文献解读褐点斑石斑鱼腹腔感染哈维氏弧

石斑鱼是东南亚受欢迎的水产养殖品种，但其养殖受到传染病爆发的影响。黏膜相关淋巴组织提供了抵抗病原体的第一道防线；然而，很少有关于石斑鱼粘膜免疫的细胞或蛋白质组学反应的研究。在感染哈维氏弧菌后4小时和96小时（hpi）以及感染后7天（dpi），从褐点石斑鱼（Epinephelusfuscoguttus）的皮肤、鳃和肠中取样，并用苏木精/伊红和阿尔新蓝/高碘酸席夫染色。用2D凝胶电泳分析皮肤粘液，并鉴定受细菌感染调控的蛋白。在感染鱼中，在4hpi检测到皮肤囊状细胞的显著增加和粘液中核苷二磷酸激酶水平的增加。96hpi时，感染鱼肠道中含有酸性粘蛋白的杯状细胞显著增多，而皮肤和鳃中含有混合粘蛋白的杯状细胞增多。粘液中蛋白酶体亚单位α-I和细胞外Cu/Zn超氧化物歧化酶水平也升高。小棒和肥大细胞似乎对感染没有反应。石斑鱼的粘膜组织对弧菌感染的反应是积极的。这些信息可能有助于改善石斑鱼健康、生产和疫苗开发的未来研究。

图1.褐点石斑鱼皮肤（a）和鳃（b）中的囊状细胞（黑色箭头），用苏木精和伊红染色，散布在杯状细胞（箭镞）和偶尔的小棒细胞（R）或肥大细胞（蓝色箭头）之间。在（c）和（d）中，数据显示对照组（未感染）或实验组（感染）内三个独立重复的注射前平均基线值（虚线）和平均±扫描电镜（短条）。实验组之间的显著值表示为：*p0.05（Studentst检验）。

感染对杯状细胞的影响

图2.褐点石斑鱼的肠（a–d）、皮肤（e–h）和鳃（i–l）中的杯状细胞用AlcianBlue/periodicacid–Schiff染色（箭头，AB阳性）或深蓝色（箭镞，AB/PAS阳性）。数据显示对照组（未感染）或实验组（感染）内三个独立重复的注射前平均基线值（虚线）和平均±扫描电镜（短条）。实验组之间的显著值表示为：*p0.05（Studentst检验）。

图3.褐点石斑鱼皮肤粘液蛋白的典型二维银染凝胶图像，斑点主要分布在等电点（pI）4-8，分子量（MW）小于kDa。选择带圆圈的斑点进行蛋白质测序和随后的鉴定。

表1.利用MASCOT搜索引擎，基于NCBIprot数据库，对从感染哈维氏弧菌的褐点石斑鱼皮肤粘液中分离到的蛋白质点进行鉴定，包括其登录号、理论和观察到的分子量/等电点、匹配肽、序列覆盖率和蛋白质得分。

图4.感染后不同时间点的皮肤粘液蛋白的标准化斑点强度。数值显示为对照组（未感染）或实验组（感染）内三个独立重复的注射前平均基线（虚线）和平均±扫描电镜（短条）。实验组组之间的显著值表示为：*p0.05（Studentst检验）。

来源：水生动物健康评估如有侵权请联系删除

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